Rotavírus fertőzés

A rotavírus fertőzés vagy a bél / gyomor influenza tüneti kezeléssel fertőző betegség. A rotavírus fertőzés a leggyakoribb gyermekeknél.

A rotavírus fertőzés különösen veszélyezteti a gyermekeket, mivel a legtöbb fertőzés ebben a populációban fordul elő.

A rotavírus-fertőzés okozója

A fertőzést rotavírusok okozzák - a Reoviridae család vírusai, amelyek az antigén összetételben hasonlóak.

A fertőzés forrása

A fertőzés forrása beteg. A fertőzés átvitele szempontjából a legveszélyesebb a rotavírus-fertőzés klinikai megnyilvánulásának első 3-5 napjában a beteg, mivel ebben az időszakban a kiürült székletben a vírus tartalom a legnagyobb.

Átviteli mechanizmus

A vírus átvitelének fő mechanizmusa a széklet-orális, kevésbé gyakori - a fertőzéssel fertőzött tárgyakkal történő rotavírus átvitele révén a háztartási érintkezési út. E tekintetben különösen veszélyes a tejtermékek. Az alacsony hőmérséklet általában nem pusztítja el a vírust, így az élelmiszer tárolása a hűtőszekrényben nem akadályozza meg a rotavírus fertőzés kialakulását.

Epidemiás rotavírus fertőzés időtartama

A betegség kitörése az őszi-téli időszakban fordul elő, azonban más évszakokban előfordulhatnak a betegség előfordulásának esetei is. A rotavírus fertőzés jellegzetes tüneteinek elterjedése és előfordulása általában influenza járvány kialakulásával jár, ezért az embereket rotavírussal fertőzötték, melyet gyakrabban "bélinfluenza" néven ismertek.

patogenézisében

Az emberi testbe való belépés után a vírus belekerül a vékonybél nyálkahártyájának sejtjeibe, ami a bél völgyeinek pusztulását okozza. A specifikus enzimek szintézise, ​​valamint a bélnyálkahártya szekréciós funkciójának megsértése súlyos hasmenéshez és a szervezet dehidratációjához vezet a nagy mennyiségű elektrolit és víz belépő belsejébe.

A rotavírus fertőzés tünetei:

• orr-torlódás;
• torokfájás;
• köhögés;
• hasi fájdalom;
• hányinger, hányás, hasmenés;
• fejfájás, láz.

klinika:

A rotavírus fertőzés fő időszakai:

• az inkubációs időszak 1-2 napig tart;
• akut időszak 3-7 napig tart;
• 4-5 napig tart.

A betegséget akut megjelenés jellemzi, de a prodromális periódus jelenléte lehetséges (kb. 2 nap). Károsodást, általános gyengeséget, fejfájást, fokozott fáradtságot, étvágytalanságot, kellemetlen érzéseket és a gyomorban zörögést okozhat. Ezenkívül a felső légutak részén a betegség megnyilvánulásának kialakulása lehetséges: orr-torlódás, torokfájás, könnyű köhögés.

Az általános klinikai kép tartalmazza a mérgezés, a gastroenteritis és a felső légutak sérüléseit.

A gastroenteritis szindróma megnyilvánulása a következők: hangos dübörgés a hasban, fájdalom, főleg a has felső részén, hányinger, hányás, hasmenés. A rotavírus-fertőzéssel kapcsolatos hasmenés vizes habos konzisztenciával rendelkezik, és sárga vagy zöldes színű.

A mérgezés szindróma megnyilvánulása: fáradtság, gyengeség, fejfájás. Súlyos esetekben: szédülés, ájulás.

A felső légutak vereségét orrfolyás, orr-torlódás, torokfájás, köhögés jellemzi. Zev fényes vörös színnel.

Komplikációk és halálozás

A betegség súlyos formáit, súlyos dehidratációval együtt a szív- és érrendszeri elégtelenség, még a halál (2-3% -ban) alakulása jellemzi. A fertőzés után instabil immunitás keletkezik, amely idővel gyengül, így lehetséges az újrafertőzés.

A rotavírus fertőzés diagnózisa

A rotavírus-fertőzés diagnosztizálása csak akkor lehetséges, ha az embereknél a rotavírus laboratóriumi diagnosztikai módszerekkel, például PCR-polimeráz-láncreakcióval, RPHA-passzív hemagglutinációs reakcióval, CSC-komplement-kötéssel, immunfluoreszcenciával és sok mással kimutatható.

A teljes vérszámlálás leukocitózist mutat majd neutrofil bal oldali eltolódással, megnövekedett ESR-rel - az akut időszakban. A helyreállítási időszakra jellemző a vérkép normalizálása. A vizeletvizsgálat fehérje-, leukocita- és vörösvérsejteket, kis mennyiségű hialinhengereket mutat.

Rotavírus fertőzés - intesztinális influenza kezelése felnőtteknél és gyermekeknél

A kezelés tüneti, mivel nincsenek specifikus antirotavirus gyógyszerek a rotavírus elleni küzdelemben.

A rotavírus fertőzés kezelésének alapelvei:

1. A rotavírus fertőzésben szenvedő beteg izolálása
2. A dehidratáció elleni küzdelem. Ehhez kívánatos speciális sóoldatokat alkalmazni, például rehydron, sóoldat. A kórházban a beteg kezelésére használják, de a fiziológiás sóoldatot a test normális sav-bázis állapotának helyreállításához otthon készíthetjük: 1 teáskanál 1 liter vízre. Ajánlatos sok ásványvizet inni.
3. A hőmérséklet elleni küzdelemnek 38, 5 vagy annál magasabb hőmérsékleten kell kezdődnie. Ugyanakkor a láz típusától függően fizikai módszereket kell használni a hőmérséklet csökkentésére, például a test vízzel való dörzsölésére és vegyszerekre - bizonyos gyógyszerek alkalmazásával, a gyermekeknél jobb gyertyákat használni.
4. Az enzimkészítmények, adszorbeáló és összehúzó szerek (aktív szén, poliszorb), tejsavbaktériumok elfogadása.
5. Tilos fájdalomcsillapítót venni a hasi fájdalom miatt.

A rotavírus-fertőzés kórházi kezelésére vonatkozó indikációk:

• progresszív romlás, tartós hasmenés;
• új tünetek megjelenése.

Diéta a rotavírus fertőzéshez:

Az étrend magában foglalja a tej és a tejtermékek, köztük a tejtermékek elkerülését. Javasoljuk, hogy az étrendbe csirke húsleves vagy rizs zabkása, vízben főzve, olaj hozzáadása nélkül. Kis szünetben, szünetekkel kell enni. Javasolt a szénhidrátokban gazdag táplálékfelvétel korlátozása.

A rotavírus fertőzés megelőzése

A rotavírus fertőzésre vonatkozó legfontosabb megelőző intézkedések a következők:

• A vírusnak a testbe való belépésének megakadályozása, beleértve a beteg elszigetelését, a rendszeres kézmosást, a bevált és kiváló minőségű termékek fogyasztását, desztillált vízzel, zöldségek és gyümölcsök mosásával;
• vendéglátó-ipari létesítmények és termékek áruházak, piacok egészségügyi ellenőrzése.

Mielőtt használná a medportal.org webhely adatait, olvassa el a felhasználói megállapodás feltételeit.

Felhasználói megállapodás

A medportal.org webhely szolgáltatásokat nyújt a jelen dokumentumban leírt feltételeknek megfelelően. A webhely használatának megkezdésével megerősíti, hogy elolvasta a jelen Felhasználási Szerződés feltételeit a webhely használata előtt, és teljes mértékben elfogadja a jelen Megállapodás összes feltételeit. Kérjük, ne használja a webhelyet, ha nem ért egyet a fenti feltételekkel.

Szolgáltatás leírása

A webhelyen közzétett összes információ csak tájékoztató jellegű, a nyilvános forrásokból származó információk hivatkozások, és nem reklámozás. A medportal.org webhely olyan szolgáltatásokat nyújt, amelyek lehetővé teszik a Felhasználó számára, hogy a gyógyszertárakban szerzett adatokból a gyógyszertárak és a medportal.org közötti megállapodás részeként keressen. A helyszíni adatok könnyebb felhasználása érdekében a gyógyszerekre vonatkozó táplálékkiegészítők rendszerezésre kerülnek és egyetlen helyesírásra kerülnek.

A medportal.org webhely olyan szolgáltatásokat nyújt, amelyek lehetővé teszik a Felhasználó számára a klinikák és egyéb orvosi információk keresését.

A felelősség korlátozása

A keresési eredményekbe helyezett információ nem nyilvános ajánlat. A medportal.org webhely adminisztrációja nem garantálja a megjelenített adatok pontosságát, teljességét és (vagy) relevanciáját. A webhely medportal.org adminisztrációja nem felelős a kárért vagy a kárért, amelyet a webhelyhez való hozzáférés, illetve a webhelyhez való hozzáférés vagy a webhely használatának vagy használatának elmulasztása miatt nem lehet.

A megállapodás feltételeinek elfogadásával Ön teljes mértékben megérti és egyetért azzal, hogy:

Az oldalon található információk csak tájékoztató jellegűek.

A medportal.org webhely adminisztrációja nem garantálja a helyszínen bejelentett hibák és az áruk tényleges elérhetőségének és a gyógyszertárban meglévő áraknak a hiányát.

A felhasználó kötelezettséget vállal arra, hogy telefonon keresztül tisztázza az érdeklődésre számot tartó információt a gyógyszertárnak, vagy használja a diszkrecionális információkat.

A medportal.org webhely adminisztrációja nem garantálja a klinikák munkarendjével kapcsolatos hibák és eltérések hiányát, azok elérhetőségét - telefonszámokat és címeket.

Sem a webhely adminisztrációja, sem az információszolgáltatásban részt vevő bármely más fél nem vállal felelősséget semmilyen kárért vagy kárért, amely esetleg felmerült az ezen weboldalon található információk teljes körű felhasználásakor.

A medportal.org webhely adminisztrációja vállalja és vállalja, hogy további erőfeszítéseket tesz annak érdekében, hogy minimálisra csökkentsék a hiányosságokat és a hibákat a megadott információkban.

A medportal.org webhely adminisztrációja nem garantálja a műszaki hibák hiányát, beleértve a szoftver működését is. A medportal.org webhelyének adminisztrációja a lehető leghamarabb vállalja, hogy minden erőfeszítést megtesz annak érdekében, hogy az esetleges hibák és hibák megtörténjenek.

A felhasználó figyelmeztet arra, hogy a medportal.org webhelyének adminisztrációja nem felelős a külső erőforrások meglátogatásáért és használatáért, amelyek linkjei a webhelyen megtalálhatók, nem biztosítják a tartalmak jóváhagyását, és nem felelősek azok elérhetőségéért.

A medportal.org webhely adminisztrációja fenntartja a jogot, hogy felfüggessze a webhelyet, részben vagy teljesen megváltoztassa a tartalmát, hogy módosítsa a Felhasználói megállapodást. Ezeket a változtatásokat csak a közigazgatás saját belátása szerint hozza meg a felhasználó előzetes értesítése nélkül.

Ön tudomásul veszi, hogy elolvasta a jelen Felhasználási Szerződés feltételeit, és teljes mértékben elfogadja a jelen Megállapodás összes feltételeit.

A hirdetési információ, amelyen a webhelyen elhelyezett hirdetés megfelelő megállapodást tartalmaz a hirdetővel, "hirdetésként" szerepel.

Rotavírus fertőzés

A rotavírus fertőzés (rotavírus gasztroenteritis) a rotavírusok által okozott akut fertőző betegség, melyre jellemző az általános mérgezés és a gyomor-bélrendszer károsodása a gastroenteritis kialakulásával.

ICD-10 kód
A08.0. Rotavirus enteritis.

A rotavirus fertőzés etiológiája (okai)

A kórokozó a Reoviridae család, a rotavírus (rotavirus) nemzetség tagja. A név a rotavírusok és a kerék (a latin "rota" - "kerék") morfológiai hasonlóságán alapul. Elektronmikroszkóppal a vírusrészecskék széles kerékagyakkal, rövid küllőkkel és egyértelműen meghatározott vékony peremmel néznek ki. Egy 65–75 nm átmérőjű rotavírus virion elektron-sűrű középpontból (magból) és két peptidhéjból áll: egy külső és egy belső kapszidból. A 38–40 nm-es mag magában foglalja a belső fehérjéket és a kettős szálú RNS által képviselt genetikai anyagot. Az emberekben és állatokban a rotavírusok genomja 11 fragmensből áll, ami valószínűleg a rotavírusok antigén sokféleségének oka. A rotavírusok replikációja az emberi szervezetben kizárólag a vékonybél epitheliális sejtjeiben történik.

Rotavírus fertőzés, nézet elektronmikroszkóppal

Négy fő antigént találtak a rotavírusban; a fő a csoport antigén, a belső kapszid fehérje. Figyelembe véve az összes csoportspecifikus antigént, a rotavírusokat hét csoportra osztjuk: A, B, C, D, E, F, G. A legtöbb emberi és állati rotavírus az A csoportba tartozik, amelyen belül az I és II alcsoportok és a szerotípusok különböztethetők meg. A II. Alcsoport a betegektől izolált törzsek 70–80% -át tartalmazza. Bizonyíték van bizonyos szerotípusok lehetséges összefüggésére a hasmenés súlyosságával.

A rotavírusok ellenállnak a környezeti tényezőknek: az ivóvízben, a nyílt víztestekben és a szennyvízben több hónapig is fennmaradnak, zöldségek esetében - 25-30 nap, pamut, gyapjú - legfeljebb 15–45 napig. A rotavírusok nem megsemmisülnek ismételt fagyasztással, fertőtlenítő oldatok, éter, kloroform, ultrahang hatására, hanem főzés közben meghalnak, 10-nél nagyobb vagy annál kisebb pH-értékkel kezeltek. 2. A vírusok optimális feltételei: hőmérséklet 4 ° C és magas (> 90%) vagy alacsony (Szerző: Fertőző betegségek: nemzeti vezetés, szerkesztette: ND Yuschuk, Yu. Ya. Vengerov. 2009

A rotavírus fertőzés diagnózisa

azt állítják,
Helyettes vezető
Fő epidemiológiai
A Szovjetunió Egészségügyi Minisztériumának osztálya
G.G.ONISCHENKO

1989. március 7. N 15-6 / 6

Rotavírus fertőzés

(MÓDSZERI JAVASLATOK)

A Szovjetunió Orvostudományi Akadémiájának Poliomielitisz és Virális Encephalitis Intézete.

A Szovjetunió Egészségügyi Minisztériuma Epidemiológiai Kutatóintézete;

Epidemiológiai és Mikrobiológiai Kutatóintézet. GN Gabrievskogo az RSFSR Egészségügyi Minisztériuma;

Tudományos Termelés Egyesület "Rostepidkompleks";

A Szovjetunió Egészségügyi Minisztériumának fertőtlenítési és sterilizálási tudományos kutatóintézete.

Az iránymutatások az egészségügyi hatóságok és intézmények szakembereinek és kutatóinak szólnak.

A humán rotavírus az állatvírusok egy csoportjához tartozik, amelyhez hasonlóan a nebraska borjú hasmenés vírus (NCDV), a fiatal egerek epizootikus hasmenése (EDJM), majom vírus (SA-II), a juhok béltartalmából származó vírus. szarvasmarhák (0), valamint a hasmenési sertések, csikók, kölykök és más állatok kórokozói. Mindezen vírusok azonos méretűek és formájúak, és antigén kifejezésekben egymáshoz közel vannak.

A rotavírus állatok jól szaporodnak a szöveti tenyészetben, ezért izolálták és tanulmányozták a humán rotavírust. A borjak és majmok rotavírusai az emberi rotavírussal való antigén közelségüknek köszönhetően az akut gastroenteritisz etiológiai szerepének megállapítására használtak, és a mai napig használták szerológiai diagnosztikájukban és az immunreaktorok előállítására.

A humán rotavírust kimutatták elektronmikroszkóppal a duodenális epithelium sejtekben és a tipikus betegek székletének kivonataiban, ahol gyakran nagyon jelentős koncentrációkban (legfeljebb 10 részecske 1,0 g ürülékben) található. A rotavírus virion egy kétkapszid (azaz egy kétszintű fehérbevonatú), 70 - 75 nm átmérőjű gömb alakú részecske, amely ribonukleinsavat - RNS-t tartalmaz (11 kétszálú szegmens), lebegő sűrűsége cézium-kloridban 1,36 g / m3. cm üledési együtthatóval 500 - 530 S

A rendelkezésre álló jellemzők szerint a humán rotavírus a fent felsorolt ​​állati vírusokkal együtt a Reoviridae család Rotavirus nemzetségének minősül. A "rotavírus" név a latin rota-ból származik - egy olyan kerék, amelyet egy vírus részecskéje elektronmikroszkópos készítményekben hasonlít.

Az ELISA-val kimutatott antigénspecifitás szerint a rotavírusok két alcsoportra oszthatók (római számokkal - I és II), és a semlegesítési reakcióban detektált specifitás alapján 4 (és esetleg több) szerotípus (arab számokkal jelölve - 1). 2, 3, 4). Az egyes rotavírusok alcsoport-specifitását a belső kapszid főfehérje határozza meg, és szerotípusos specificitásukat a külső kapszid glikoproteinje határozza meg. A nemrégiben felfedezett új típusú rotavírusokat (ún. Pararotavirusokat), amelyek nem rendelkeznek csoportspecifikus antigénnel.

A rotavírus fertőzés elterjedt. Az azonosításra vonatkozó információkat Ausztráliában, Nagy-Britanniában, GDR-ben, Kanadában, Indiában, Spanyolországban, USA-ban, Franciaországban, Japánban és sok más országban tették közzé. A Szovjetunióban az RSFSR, Transkaukázia, Ukrajna, a balti államok, Közép-Ázsia és más területek számos régiójában regisztráltak a rotavírus gastroenteritis betegségei a gyermekek és felnőttek körében. Gyermekek és felnőttek körében a rotavírus fertőzés sporadikus esetek, helyi csoportbetegségek és tömeges kitörések formájában jelentkezhet, amelyeken a különböző népességcsoportok nagy területeken terjednek. Az akut bélfertőzésben szenvedő kórházi betegek körében a rotavírus gasztroenteritiszben szenvedő felnőttek aránya átlagosan 10–15%, a 15–27% vagy annál több gyermek. A rotavírus (antigén) egészséges gyermekekkel és felnőttekkel való izolálására vonatkozó irodalmi adatok nagyon ellentmondásosak: a gyermekeknél 0–0,5–42%, a felnőtteknél pedig 0–7%. A rotavírus-fertőzést egész évben rögzítik. Azonban a betegek több mint 70% -a észlelhető a hideg évszakban. A téli-tavaszi időszakban a populáció körében a rotavírus-fertőzések nagy része, valamint az újszülöttek és a koraszülöttek, a szervezett csoportok, az idősek körében kialakult csoportbetegségek is szerepelnek. Nem volt szignifikáns különbség a rotavírus fertőzések (gyermekek és felnőttek) eloszlásában nemek szerint.

A fertőzés forrása a rotavírus etiológiájú akut bélfertőzésekben a fertőzött felnőttek és gyermekek - a fertőzés nyilvánvaló formájával vagy a székletből származó aszimptómás szekréciós rotavírusokkal rendelkező betegek. Ugyanakkor az első életévi gyerekek gyakran fertőzöttek a rotavírus által fertőzött anyáktól, valamint az idősebb gyermekektől és a szervezett gyermekcsoportok gyermekeitől. Az állatokból származó fertőzés nem bizonyított, bár annak lehetősége nem zárható ki. Jelenleg a különböző szerotípusú rotavírusok közel 50 állatfaj és madár ürülékében találhatók, kifejezett hasmenés jelei és nélkülük.

A betegek és a betegek klinikai megnyilvánulása nélküli rotavírusok jelenleg csak a székletben találhatók. A betegek a betegség első napjától kezdve a betegek rotavírusokat választanak ki a környezetbe, míg a betegek első öt napja során a betegek legmagasabb mennyiségét kimutatták a székletben (legfeljebb 10 - 10 vírusrészecske 1 g-on), ami meghatározza a betegek legmagasabb epidemiológiai kockázatát másoknak. ez a betegség időszak. A következő 6-10 napon belül a rotavirusok felszabadulása a betegek székletével meredeken csökken, ahogy a széklet normalizálódik. A rotavírusok átlagos kiválasztási ideje 7–8 nap, de egyes betegeknél ez az időtartam 20–30 napig tarthat. A betegség klinikai megnyilvánulása nélküli személyek a rotavírusok hosszú távú felszabadulását eredményezhetik - akár több hónapig vagy annál is hosszabb ideig (megfigyelési időszak).

A rotavírusok átvitelének fő mechanizmusa a széklet-orális, melyet víz-, élelmiszer- és hazai átviteli útvonalak valósítanak meg. Sporadikus és helyi csoportbetegségek esetén a rotavírusok fertőzése elsősorban háztartási eszközökkel történik. Ez hozzájárul a rotavírusok nagyon alacsony patogén dózisához (10 vírusrészen belül). Megállapították, hogy a különböző környezeti helyeken a rotavírusok életképességét 10-15 napig (a hőmérséklettől és a páratartalomtól függően) egy hónapig megtartják; székletben néhány héttől hét hónapig.

Jelenleg a rotavírus fertőzés víz- és élelmiszerproblémáit hazánkban és külföldön rögzítjük. A rotavírusok a folyók, tavak, tengerek, talajvíz, csapvíz, bizonyos élelmiszertermékek (tej stb.) Vízében találhatók.

Feltételezhető, hogy bizonyos esetekben a csepegtető, a por és a rotavírus más útjainak megvalósítása lehetséges.

A rotavírusok az egyik legfontosabb etiológiai ágensként ismertek az akut gasztroenteritisz nosokominális (nosokomiális) kitöréseiben. Különböző profilú kórházakban a beteg gyermekek 50-60% -a fertőzhet. Vannak esetek, amikor a szülési otthonok kitörnek. Gyakran érinti az akut és krónikus betegségben szenvedő mesterséges táplálkozásban élő gyermekeket különböző típusú immunhiányokkal.

Érzékenységi immunitás. Az összes korcsoportba tartozó emberek fogékonyak a rotavírusra. A legnagyobb érzékenységet a 6 hónapos gyermekeknél figyelték meg. legfeljebb 2 év. A rotavírusokkal szembeni antitesteket az első életévben a gyermekek 50–60% -ában, 3 évesnél idősebb korban észlelik - több mint 90% -ban és szinte minden felnőttnél. Az irodalom szerint azonban az antitestek jelenléte a szérumban alapvetően csak az emberi test találkozását jelzi a rotavírussal, és nem az immunitás jelenlétével, mivel még jelentős humorális antitestek esetén is ismétlődő betegségek lehetségesek. A rotavírus fertőzéssel szembeni immunitás nem teljesen ismert. A fertőzéssel szembeni rezisztenciát feltételezzük, hogy főként a vékonybél epithelium sejtek helyi immunitása, ami az IgA osztály szekréciós antitestjeinek jelenlétéhez kapcsolódik. Ezeket az antitesteket egy szoptató anyatejben is megtalálják, és nyilvánvalóan az újszülöttek passzív immunizálásának tényezőjeként szolgálnak, amelyek a betegség klinikai megnyilvánulása nélkül ürülékkel jelentős mennyiségű rotavírust szabadíthatnak fel a környezetbe, és megfertőzhetik a korai csecsemőket és a kedvezőtlen premorbid hátterű gyermekeket. A különböző szerotípusok rotavírusai nem hoznak létre kereszt-immunitást, ezért ugyanaz a gyermek vagy felnőtt ismételt betegségeket okozhat a vírus más szerotípusai miatt. Megfigyelték a rotavírus gasztroenteritisben szenvedő betegek immunitásának instabil természetét is, az ismétlődő betegségeket gyakran 1–1,5 évvel a fertőzés után rögzítik.

A rotavírus fertőzéssel járó járvány folyamatának jellemzői:

- a területi eloszlás mindenütt jelenléte;

- súlyos téli vagy téli-tavaszi szezonalitás;

- a kórokozó alacsony fertőző dózisa és a magas fokú szervezett csoportok;

- kár minden korosztály számára;

- a 2 év alatti gyermekek körében az esetek nagy része az élet második felében a gyermekek körében a betegségek maximális felismerésével;

- a víz és a hazai átviteli útvonalak nagy aktivitása;

- otthoni fókusz helyszíne, főként a családra korlátozva;

- a rotavírusok aszimptomatikus izolálása a gyermekek és felnőttek között;

- a kórházi fertőzés lehetősége az orvosi személyzet és a beteg gyermekek szülei részvételével.

A rotavírus-fertőzés klinikai képe sok más a különböző etiológiájú akut bélbetegségek klinikai megnyilvánulásaival, ami megnehezíti a betegség diagnosztizálását. Számos olyan jellegzetes különbség van, amelyek lehetővé teszik a betegség időbeni gyanúját, és helyesen végeznek járványellenes és terápiás intézkedéseket.

Az inkubációs periódus rövid és 15 órától 3 - 5 napig tart, de leggyakrabban - 1-3 nap.

A legtöbb betegnek akut a betegség kezdete van, amikor a betegség első napjaiban a teljes tünetegyüttes kialakul. Kisgyermekeknél lehetséges egy szubakut kezdet, melyre jellemző, hogy a betegség első napjaiban egy vagy két tünet jelentkezik, és a többi 2–3 napos betegséggel jár. A rotavírus-fertőzés leginkább pathognomonic a gyomor-bélrendszer károsodása, amelyet a betegek 60–70% -ában a légutak károsodásának tünetei alakítanak ki. Előfordulhat, hogy a szürkehályog tünetei a bél diszfunkció 3-4 napja előtt előfordulhatnak. A légzőszervi szindrómát a garat, a lágy szájpad és a pálmaívek mérsékelt hiperémia és granularitása, az orr-torlódás, a köhögés jellemzi, amely az ARVI-val ellentétben kevésbé kifejezett, nincs hajlam a növekedésre és rövid életű (4-5 nap). A hasmenés a betegek 95–97% -ánál fordul elő. A rotavírus fertőzésre jellemző a gastroenteritis, kevésbé enteritis kialakulása. A szék általában folyékony, vizes, habos, rosszul színezett, szennyeződés nélkül vagy kis mennyiségű nyálkával. Kisgyermekeknél vízeses hasmenés uralkodik, ami magyarázza az exsicosis gyakoribb alakulását ebben a korcsoportban. A széklet átlagos gyakorisága nem haladja meg a napi 4–5-ször, de a fiatalabb gyermekeknél 15–20-szoros lehet. A felnőtteknél és az idősebb gyermekeknél a hasmenés időtartama 3 - 7 nap, a csecsemők gyakran 10 - 14 napig tartanak. A hányás kardinális tünet, és a rotavírus fertőzésben szenvedő betegek 80% -ánál jelentkezik. Leggyakrabban hasmenéssel vagy előzőleg előfordul. A hányást gyakran megismételik, de rövid távon (1-2 nap). Ennek a fertőzésnek az ismétlődő és ellenőrizetlen hányása nem jellemző, és gyakran vegyes fertőzést jelez. A hőmérséklet általában nem haladja meg a 38,5 - 39 ° C-ot, és 3-4 napos betegséggel normalizálódik. Az általános mérgezés leggyakoribb jelei a gyengeség, letargia, gyengeség, fejfájás, szédülés. A betegség súlyosságát az izotóniás exszicózis, az I - II fok, a ritkábban III fokú fejlettség határozza meg, amely a csecsemőknél gyakoribb. Ugyanakkor az elektrolitveszteségek (Na és K) kicsiek, amelyeket a rehidratációs terápia során figyelembe kell venni.

4. Diagnózis és differenciáldiagnózis

Objektív vizsgálat a letargia, a kötőhártya hiperémia és a szkera vérkeringése. A nyelv mérsékelten bevont, száraz. A has puha, mérsékelten fájdalmas a vékonybél területén. A máj és a lép nem nő. Vak és sigmoid vastagbél puha, fájdalommentes. A vérnyomás csökken. Az impulzus nem túlterhelt, hanem inkább relatív bradycardiára hajlamos. Nincsenek meningális jelenségek. A perifériás vérben, a betegség kezdetén mérsékelt leukocitózis fordulhat elő, a betegség 2–3 napja hajlamos a leukopeniára, a leukocita szuszpenziók számának csökkenésével és a limfociták és a monociták számának növekedésével, az ESR nem gyorsul.

A vizelet laboratóriumi elemzésében enyhe albuminuria, gyorsan elhaladó mikrohematuria, a leukociták számának enyhe növekedése, valamint a hialinhengerek megjelenése lehetséges. A vizelet változása összhangban van a betegség súlyosságával és a kiszáradással.

A széklet mikroszkópos vizsgálata a leukociták száma a látómezőben nem haladja meg a 10-15-et, a nyálkahártya keveréke van.

Rektoromanoszkóposan lehetőség van a végbél nyálkahártyájának mérsékelt hiperémiájának feltárására, a fókuszváltozások nélkül.

A rotavírus gastroenteritist súlyossággal osztják, amit a hasmenés intenzitása és az általa okozott dehidratáció, valamint az általános mérgezés súlyossága határoz meg. A rotavírus gasztroenteritisz három fokos súlyosságú: enyhe, közepesen nehéz és ritkábban súlyos.

A differenciáldiagnosztikát szalmonellózissal, kolerával, dizentériával, táplálkozással járó toxicitással, feltételesen patogén mikroorganizmusok, persiniosis és más vírusos gastroenteritis okozta.

A szalmonellózis gastrointestinalis formáját a rossz minőségű termékeket fogyasztók egyidejű betegsége jellemzi. Tipikusan akut megjelenés: hipertermia, súlyos hidegrázás, hányás, súlyos hasi fájdalom, bőséges széklet, amely megtartja a széklet karakterét, neutrofil leukocitózis a leukocita képlet balra történő eltolódásával. Amikor a szalmonellózis nem változik a garat nyálkahártyájában, a máj általában megnagyobbodik. A kórokozó izolálása a széklet, a hányás vagy a gyomormosás bakteriológiai vizsgálatában megoldja a diagnózist.

A betegség tömegének és gyorsaságának számos klinikai jele szerint a rotavírus gastroenteritis hasonlít a kolerára. De a rotavírus-fertőzés enyhébb, és különösen az a tény, hogy nem fejleszti az algid állapotát, valamint az oropharynx nyálkahártyájában jellemző változások jelenlétét.

A legfontosabbak a bakteriológiai kutatások eredményei a Vibrio cholerae kimutatása esetén. Hasonló helyzet fordul elő az NAG-fertőzés esetén.

A bakteriális dizentéria jellemzője az akut hasi fájdalom, gyakori, néha hamis, sürgető, nyálkával és vérrel kevert széklet, markáns sigmoiditis, állandó lázas reakció, patológiai változások a vastagbél disztális szakaszában a rektoszkópia szerint. Mindezek a jelek, valamint a bakteriológiai kutatások eredményei viszonylag könnyen megkülönböztetik a diszentéria kolitisz formájának differenciáldiagnosztikáját. A dizentéria gastroenterikus formája esetén a bakteriológiai vizsgálatok eredményei drámai mértékben nőnek.

Különösen nehéz a rotavírus gasztroenteritis és az opportunista kórokozók által okozott táplálékban lévő toxininfekciók differenciális diagnosztikája, mivel ezek a betegségek klinikai képe nem megfelelő. A laboratóriumi vizsgálatok diagnosztikai jelentősége szerint előnyben kell részesíteni a betegség rotavírus jellegét igazoló virológiai és immunológiai vizsgálatok pozitív eredményeit, nem pedig a beteg székletében feltételesen patogén baktériumok kimutatását.

A periniosis gasztrointesztinális formájára jellemző fokozatosabb kialakulás, az izom- és ízületi fájdalmak jelenléte a gasztroenteritisz mellett; a máj általában megnagyobbodik; a széklet viszkózus a nyálka jelentős keveréke miatt, és néha vér is lehetséges. A vérben a leukocitózist észlelik; Az ESR megnövekedett.

A gasztroenteritis szindróma néhány vírusbetegségben kiemelkedő lehet. Ezek közé tartozik az adenovírus-fertőzés, amely a bélelváltozások mellett a kötőhártya-gyulladás, a rhinitis, a faringitis, a mandulagyulladás, a hörghurut, a tüdőgyulladás, a nyaki nyirokcsomók, a máj, a lép, a hosszan tartó láz.

Az enteritisz és a gastroenteritis, a Koksaki és az ECHO által okozott enterovírusok miatt a rotavírus gastroenteritist egy monoszinomikus klinikai kép jellemzi, amelyben a bél károsodása a vezető hely. Ezzel ellentétben az enterovírus természetének járványos kitörése során a betegség különböző klinikai formáinak jelenléte, a klinikai kép "többszörössége", amelyben az agy, a bőr és a felső légúti membránok károsodásának tünetei jelentős szerepet játszhatnak.

A gyermekeknél a colibacillosisban fellépő rotavírus-fertőzés differenciális diagnózisa a legnehezebb, és az alábbi kritériumokon alapulhat:

- a rotavirus fertőzés nagyobb akut kialakulása a colibacillosishoz képest, különösen az enteropatogén kolibacillózis miatt;

- a rotavírus-fertőzés gyorsabb fellépése, még kisgyermekeknél is;

- rotavírus-fertőzés esetén a légzési szindróma nagyobb gyakorisága, de kisebb súlyossága és időtartama.

A legnagyobb nehézség a kevert rotavírus-bakteriális fertőzések diagnosztizálása, amelynek aránya az év téli időszakában meglehetősen nagy (az összes OKI 7-10% -a).

A vegyes fertőzések klinikájának egyik jellemzője a mindkét kombinált fertőzésre jellemző tünetegyüttesek: a mérgezés tüneteinek növekedése, a kis- és vastagbél nyálkahártyájában fellépő gyulladásos változások jeleinek megjelenése, és lassabb gyógyulás.

A rotavírusok által okozott gyanús OCI okozta gyermekek és felnőttek kórházi kezelése a klinikai (betegségi súlyosság) és járványügyi jelzések szerint történik (gyenge gyerekek jelenléte a beteg környezetében, az első életévi gyerekek, az óvodáskorú gyermekek intézményei, az élelmiszeriparban dolgozók és a hozzájuk hasonló személyek) nem képes megfelelni az otthon járó járványellenes rezsimnek, stb.). Egy éven aluli gyermekek súlyos OCI tünetekkel először kórházba kerülnek. Kötelező a különféle etiológiájú (külön osztályok, dobozok) gyanús rotavírus-gyomor-gyulladásos és akut bélfertőzésben szenvedő betegek különálló kórházi kezelése. A kamrák (dobozok) egyszeri feltöltésének elvét be kell tartani.

A rotavírus gasztroenteritisben szenvedő betegek kezelése, figyelembe véve a betegség patogenezisére vonatkozó meglévő elképzeléseket, magában foglal egy megtakarító kezelési módot és kompenzációt a bél funkcionális állapotának megsértésére, a hidroelektrolit egyensúly helyreállítására és a test méregtelenítésére.

A betegség akut periódusa idején 4-B diétát írnak elő, amelyben a szénhidrátok (legfeljebb 200 g) éles korlátozása és a fehérje mennyiségének (akár 150 g-ig) növekedése a kalóriatartalom enyhe csökkenésével (2400 cal). A cukor mennyisége naponta 40 g, zöldség és gyümölcs. A tej kizárt. A só nem korlátozott.

Az ilyen házi emésztő multienzim készítmények, mint az oraz, solizim, somiláz, amelyek a rotavírus gasztroenteritisben szenvedő betegek kezelésében nem alacsonyabbak az importálásnál (panzinorm, emésztés, ünnepi, trienzim stb.), Célja.

A szervezet dehidratálódásának mértékét szükségszerűen értékeljük, és a terápiát a víz és a sók felesleges veszteségeinek pótlására végezzük. Amikor a dehidratáció az I. - II. A glükóz-elektrolit oldatokat orálisan adjuk be a Pokrovsky-nak (rehydron glükozolán), figyelembe véve a folyadékok és elektrolitok elvesztését, és a III. Fokozat dehidratálásakor meg kell kezdeni a kezelést víz-sóoldatok (triszol, kvaroszol, chlosol, acesol) intravénás adagolásával stb.

A megoldások bevezetésének taktikája a rehidratációs terápia alapelveivel összhangban történik.

A normális vérkeringés és a méregtelenítés stabilizálásához kolloid oldatokat (gemodez, polyglukin, reopolyglukin) lehet bevinni.

Hangsúlyozni kell, hogy az antibakteriális gyógyszerek felírása, ha egyidejűleg nincs bakteriális fertőzés, nem indokolt.

Ajánlatos adszorbens és zsugorító szereket használni.

A vírusfertőzés kezelése jelenleg nem fejlett.

A regenerálódó extraktumot a széklet stabil (2 - 3 napos) normalizálódása után és az alapbetegség összes többi klinikai tünetének eltűnése után végezzük komplikációk hiányában.

A klinikai tünetek eltűnése után az óvodai intézményekben, az élelmiszer-ipari létesítményekben dolgozó munkavállalók és a hozzájuk hasonlított személyek egyszeri virológiai vizsgálatot kapnak.

A betegek fennmaradó kontingensei nem tartoznak kötelező laboratóriumi vizsgálat alá.

6. Laboratóriumi diagnózis

A rotavírus gastroenteritis laboratóriumi diagnózisa jelenleg nem nehéz. A klinikai szindróma és a rövid távú kórházi tartózkodás gyors fejlődése szükségessé teszi a betegség etiológiájának meghatározására szolgáló gyors módszerek használatát. A kézikönyvben javasolt laboratóriumi diagnosztikai módszerek többsége lehetővé teszi a rotavírusok észlelését az első napon. A módszer kiválasztását minden esetben a laboratórium műszaki felszerelése határozza meg, valamint a megfelelő reagensek rendelkezésre állását.

A betegek szérumában a szerológiai változások kimutatására szolgáló hagyományos módszerek (semlegesítési reakció, hemagglutináció gátlás és komplement-rögzítés) fontosak a betegség retrospektív elemzésében. Ezért a rotavírus fertőzés korai szerológiai diagnosztizálásához ajánlott az IgM osztályú antitestek meghatározása.

A beteg személy virológiai vizsgálata általában széklet. A rotavírusok jelenlétét és eloszlását a környezetben a talaj, az élelmiszer és a víz mintáinak (szennyvíz, természetes és mesterséges víztározók, ivóvíz) vizsgálata útján vizsgáljuk.

6.1. Rotavírusok kimutatása klinikai anyagban

és a környezeti mintákban

6.1.1. A minta előkészítése a vizsgálathoz; mintavétel

A virológiai kutatások során vett minták vételekor néhány általános követelmény teljesül, és intézkedéseket tesz az anyag szennyeződés elleni védelmére. A mintákat csak steril edényekben, sűrű gumidugóval, erősített ragasztó vakolatsal veszik. A mintákat jéggel vagy hűtőközeggel tartályokban szállítjuk.

6.1.2. Felfüggesztés előkészítése, tisztázás,

mintatisztítás, baktériumok eltávolítása

A rotavírus-vizsgálatra irányuló székletminták előállítása magában foglalja a 10% -os szuszpenzió előállítását, homogenizálást, centrifugálást 3000 fordulat / perc sebességgel. 30 percen belül a baktériumok eltávolítására. A környezet és az élelmiszertermékek vizsgálata során a vizsgált anyag előkoncentrációja történik.

6.1.3. A vírusrészecskék koncentrációja a vízmintákban

A rotavírusok koncentrációja fontos feltétele annak, hogy a vízi környezetben kimutassák hatékonyságukat.

A rotavírusok porózus szilícium-dioxidon - makropórusos üvegen (MPS) történő adszorpciós kromatográfiával történő koncentrálására szolgáló módszer egyszerű és kényelmes, 0,1–10 liter vízmennyiség alkalmazásával. Amikor a mintát az MPS-rétegen áthaladjuk, a vírust az üvegfelületre bontjuk. A vírus elúciójára olyan megoldások alkalmazásával, amelyek képesek a vírus deszorpcióját kiváltani. A vírust kis mennyiségű oldattal eltávolítjuk az üvegből, ami az eredeti mintához képest több tíz-százszoros koncentrációhoz vezet.

Az adszorpciós tulajdonságok javítása érdekében az MPS-1000 VGH márka üvegből készült házi készítményeit az alábbiak szerint kezelik: 3% HO és 6 M HCl keveréke (1: 1) készül. Az üveget az előkészített keverékkel 1 térfogat üveg keverjük 2 térfogatnyi keverékre. Forraljuk egy füstelszívóban (dugó nélkül) 1 órán át, figyelve a biztonsági előírásokat. A reakcióelegyet semleges pH-ra mossuk desztillált vízzel. 100 ° C-on szárítjuk.

Üveg oszlop, előkezelt szilikon folyadékkal, üveggel töltött (2 - 3 cm3), desztillált vízben áztatott. A vizsgálati mintához (3 l) adjunk hozzá 1 M MgCl-oldatot 0,05 M végkoncentrációig. A vizet 150-500 ml / óra sebességgel vezetjük át az oszlopon, és az áramlási sebességet klipekkel állítjuk be. Átmegyünk az oszlopon 10 ml elúciós oldatot: húskivonat 3%, pH 9,0; vagy triptóz-foszfátleves 1%, pH 9,0; vagy 0,1 M Tris-HCI, amely 2 M NaCl-ot, pH = 11,0-t tartalmaz (az oldatokat az elúciós tulajdonságaik csökkenésének sorrendjében soroljuk fel). Az 1 ml térfogatú frakciókat szorbáljuk, a frakciók pH-ját semleges értékre állítjuk be.

6.2. Vírusrészecskék kimutatása elektronmikroszkópos (EM) és immunelektronmikroszkópiával (IEM)

Mivel a rotavírus részecskék tartalma a tipikus betegek székletében általában magas a betegség 2-3 napja alatt, az EM módszer széles körben alkalmazható a rotavírus kimutatására, amely felhasználható a rotavirus részecskék kimutatására a széklet szuszpenzió további koncentrációja nélkül.

A gyógyszerkészítmények előállításához a vizsgált 10% -os szuszpenzió cseppét egy fogászati ​​viasz vagy viaszpapír lemezre visszük fel. A film-szubsztrátum cseppénél lefektessük a tárgy elektron-mikroszkópos rácsát. 1-3 perc múlva a rácsot egy csepp desztillált vízzel és egy kontrasztoldattal (2% -os foszforot-bonsavoldat mosásával, pH = 6,5 - 6,6-ra állítjuk 1 NKOH-val), amelynek feleslege 30-40 másodperc után. távolítsa el a szűrőpapírt, és a hálót szárítjuk. A készítmények megtekintését elektronmikroszkóppal, 30 - 50000x-os műszeres nagyítással végezzük.

A vírusrészecskék jellegzetes méreteiben és morfológiájában a széklet szuszpenziók EM vizsgálatával a rotavírusok igen könnyen kimutathatóak. A rotavírusokat különbözni kell a különböző vírusrészecskéktől és vírusszerű formációktól, a bakteriofág részecskéktől és a székletben található bakteriális flagellától.

Az IEM technológia használata egyes esetekben lehetővé teszi nemcsak a rotavírusok kimutatásának százalékos arányának növelését, hanem az etiológiai szerepük bizonyítását is. Az IEM vizsgálathoz 0,1 ml 1: 5 arányú hígított immunszérumot keverünk össze 0,4 ml 10% székletkivonattal. Az elegyet 1 órán át szobahőmérsékleten, majd 12 órán át 4 ° C-on inkubáljuk, majd 90 percig centrifugáljuk. 15 000 fordulat / perc sebességgel A felülúszót elvezetjük, és a keletkezett csapadékot néhány csepp desztillált vízben újraszuszpendáljuk, 2% -os foszforsav-savval (pH 6,5) ellentétben és objektumrácsokra helyezve; a felesleges nedvességet szűrőpapírral eltávolítjuk. A gyógyszerek vizsgálatát egy 50000x-os műszeres nagyítású elektronmikroszkóppal végeztük, a tárgyháló legalább öt celláját tekintve. Pozitív eredmény esetén a rotavírus részecskéket specifikus klaszterek (immunkomplexek) formájában detektálják a készítményekben.

6.3. Rotavírus antigén kimutatása a vizsgálati anyagban

6.3.1. Immuneagensek beszerzése

A hiperimmun szérumokat és specifikus rotavírus immunglobulinokat nyulak, tengerimalacok, csirkék immunizálásával nyerjük.

Az immunizáláshoz használt antigént az alábbiak szerint állítottuk elő: 5 ml rotavírus SA-II tenyésztési szuszpenzióját tripszinnel kezeltük, hozzáadtunk 1,5 literes matraclombikhoz, a 4647 zöld majom vese monopórusos sejtjeivel, 60 percig 37 ° C-on inkubáltuk; adjunk hozzá szérummentes karbantartó táptalajt, és inkubáljuk 24-48 órán át 37 ° C-on. Minden biomasszát 3-szoros fagyasztásnak vagy ultrahangos kezelésnek vetünk alá, hozzáadunk PEG M 6000 - 8-10% koncentrációt, hagyjuk 20 órán át 4 ° C-on tartani, majd 10 000 fordulat / perc sebességgel centrifugáltuk. 2 óra A pelletet PBS-ben szuszpendáljuk (1/30 - 1/50 a biomassza térfogatából). A freon 113-mal való tisztítás után a vizes fázist az állatok immunizálására és az immunológiai vizsgálatokban alkalmazott antigént használják. A koncentrátum 1 ml térfogatban legalább 10 vírusrészecskét tartalmaz.

Nyulak immunizálása: a nyulakat intravénásán injekciózzuk 2 ml rotavírus-készítményrel az 1., 7., 35., 42. napon, és a vért a 49. napon az immunizálás megkezdése után veszik. Az 1. és 35. napon az antigént egy további Freund teljes adjuvánssal injektáljuk a hátsó rész több pontján.

Az immunglobulin frakciót hiperimmun nyúlszérumból kicsapjuk 10% -os polietilénglikol (PEG) vizes oldatával 6000 molekulatömeggel. A csapadékot centrifugálással összegyűjtjük, feloldjuk és 0,01 M K-foszfát pufferrel (pH = 7,4) 0:01 M Nace-vel oldjuk és dializáljuk. FSB). Az immunoglobulinok koncentrációját spektrofotometriásan határozzuk meg.

Tengerimalacok immunizálása: az állatokat intramuszkulárisan injektáljuk 0,5 ml koncentrált rotavírus készítményrel, amely azonos térfogatú Freund teljes adjuvánst tartalmaz 1.14. És 28. napon, a vérmintát két héttel az utolsó immunizálás után.

A csirkék immunizálása: a fehér Leghorn Zarya-17 fajta hibridjeiből 20 hetes csirkéket 1, 14, 28 napon át intravénásan immunizáltunk. Az első immunizálás során az antigént intramuszkulárisan adjuk be egy azonos térfogatú Freund teljes adjuvánst tartalmazó elegyben. A tojássárgában lévő antitest maximális mennyiségét a harmadik immunizálás után figyeljük meg. A csirkék az újraimmunizálás után tartósan használhatók.

A csirkék immunoglobulinainak izolálása: a sárgáját a héj vagy a Büchner tölcsérben levő fehérjéből elválasztjuk és csapvízzel mossuk. A sárgáját (10 ml) centrifugacsőbe visszük, hozzáadunk 20 ml FSB-t és alaposan keverjük össze. A PEG 6000-et 3,5 tömeg% koncentrációban alkalmazzuk és 10 percig keverjük. 14000 g. A felülúszót szűrőpapíron át szűrjük egy mérőhengerbe. Adjunk hozzá további PEG 6000-et 12% végkoncentrációhoz és keverjük össze. A kicsapódott immunglobulinokat centrifugálással (10 perc 14 000) összegyűjtjük. A csapadékot feloldjuk 5 ml FSB-ben (1/2 térfogatú sárgája). A fehérje koncentrációja a készítményben általában 6 - 12 mg / ml.

6.3.2. Az enzim immunoassay módszer (ELISA)

Az enzimmolekulával jelölt antitestek (peroxidáz) alkalmazásával az enzim immunoassay (ELISA) módszer az egyik leggyakoribb és leghatékonyabb módszer a vírusantigén kimutatására. Általában a közvetlen és közvetett "szendvics" - opciókat használja. Az enzim marker a szubsztrátummal való színreakcióban kimutatható. A közvetlen ELISA-változat gyorsabb, mint a közvetett, de kevésbé érzékeny és specifikus. Egy közvetett változat formulációjában az immunglobulinok anti-specifikus kereskedelmi konjugátumát használják egy enzimmel; A konjugátum és a panelre beágyazott antitestek közötti nem specifikus kölcsönhatások megelőzése érdekében két különböző állatfaj vírusellenes szérumát kell biztosítani.

Közvetett ELISA-változat: 0,1 ml anti-thromtaun immunglobulinokat az immunizált csirkék tojássárgájából a kutak fele (48) -ában bevezettünk a lyukakba. A másik felében az immunizálás előtt elhelyezett tojásokból származó immunoglobulinokat negatív kontrollként adjuk be. Az immunglobulinok szorpcióját 5 μg / ml koncentrációjú PBS-ben oldjuk egy éjszakán át 4 ° C-on. A lyukak tartalmát leöntjük, a lyukakat PBS-T-vel mossuk, és 0,1 ml vizsgálati mintát PBS-T-ben, 1% BSA-val és 0,01 M EDTA-val adunk az antirotavirus és a normál immunglobulinokhoz, és 1 órán át 37 ° C-on inkubáljuk.

Mosás után 0,1 ml 1: 1000-1: 25000-re hígított nyúl anti-rotavírus szérumot adunk a PBS-T pufferben lévő üregekhez. A szérum optimális hígítását előre meghatározott kísérletekben határozzuk meg. A paneleket lezárjuk és 2 órán át 37 ° C-on inkubáljuk. A lyukakat mossuk, és 0,1 ml 2,5 ml / ml koncentrációjú nyúl IgG elleni peroxidázzal jelölt antitestek PBSB-T-BSA-ban lévő peroxidáz-tartalmú koncentrációját tartalmazó oldatát adjuk hozzá, és 1 órán át 37 ° C-on inkubáljuk. A lyukakat mossuk, 0,1 ml frissen elkészített szubsztrátkeveréket adunk hozzá (0,5 mg / ml O-fenilén-diamin 0,05 M Na-citrát pufferben, pH 5,0; HO - 0,03%. (Figyelem! legyen óvatos!)) és szobahőmérsékleten sötétben inkubáljuk 30-40 percig. Az enzimatikus reakciót 0,05 ml 3 M H SO hozzáadásával állítjuk le. A reakció eredményei vizuálisan vagy spektrofotometriásan vesznek figyelembe. A mintákat pozitívnak tekintjük, amelynek optikai sűrűsége nem kevesebb, mint a negatív kontroll optikai sűrűségének kétszerese.

6.3.3. Koagglutinációs módszer

Ez az eljárás a Cowan-törzs A-protein Staphylococcus aureus-jának az IgG Fc-fragmensével való kapcsolódási képességén alapul, és egy specifikus antigén-antitest komplex kialakulása során az agglutinációs jelenséget okozza.

A koagglutinációs reakció elkészítéséhez egy kereskedelmi forgalomban kapható, A-fehérjét (Pasteur Research Institute of Electrochemical Medicine, Leningrad) tartalmazó, száraz sztaphilokokk reagenst használunk, amelyet felhasználás előtt 0,1% -os metilén-kék oldatban rehidrálunk.

Korábban a hiperimmun szérum minden egyes sorozatát antisztaphylococcus antitestek jelenlétére teszteltük. Ehhez egy üveglemezen egyenlő térfogatú szérumot keverünk 1: 500 és 10% -os sztaphilokokkusz-szuszpenzió hígításával. Vegye figyelembe az eredményeket 5 percen belül az oktatásból. A kiválasztott szérum, amely nem tartalmaz antisztafilokokkális antitesteket 1: 500 hígításban, munkájához. A diagnicum előállításához 0,01 ml FSB-vel 1:10 arányban hígított anti-ratavirus szérumot összekeverünk 0,5 ml 10% -os sztaphylococcus szuszpenzióval, szobahőmérsékleten 1 órán át, majd 9,5 ml FSB-t (diagnosticum) adunk hozzá. Hasonlóképpen, a staphylococcus-t szenzibilizálják preimmun szérummal (kontroll reagens). A Diagnosticum és a kontroll reagenseket a PKA és a TRKA reakciójában használják.

Ahhoz, hogy az RCA-t a panel u alakú lyukaiban állítsuk be, készítsünk 0,05 ml PBS-t (pH 7,4); két lyukban a Takacchi mikrotiter vagy adagolója 0,05 ml 10% széklet szuszpenziót készít, és készítsen sorozatos, kétszeres hígításokat 1: 2 - 1: 256. Az első sor üregeihez 0,05 ml diagnosztikát, a második sorban pedig 0,05 ml kontroll reagenst adunk. A paneleket fedővel fedjük le, és termosztátban 37 ° C - 3 óra hosszat inkubáljuk. Minden kísérletben a rotavírusra pozitív és negatív székletből álló szuszpenzió mintája, valamint a rotavirus SA-II-vel fertőzött sejtek lizátumai, amelyeket korábban elektronmikroszkóposan teszteltek.

A reakció figyelembevétele: az eredményeket akkor tekintjük pozitívnak, ha a diagnosztikával együtt agglutinációs „esernyőt” észlelünk, negatív eredménnyel vagy 4-szeres csökkenéssel a kontroll reagenssel párhuzamosan. Az eredményeket negatívnak tekintjük, ha a lemezek mindkét párhuzamos sorban formálódnak. A párosított sorokban a nem specifikus koagglutináció kiküszöbölése érdekében a székletszuszpenziót 2 órán át 37 ° C-on azonos térfogatú normál nyúlszérummal adszorbeáljuk, majd 45 percig 80 ° C-on melegítjük. Ezután ismételje meg a koagglutináció reakcióját.

6.3.4. A koagglutináció szilárd fázisú reakciójának módszere (TRKA)

A rotavírus antigének kimutatására szolgáló módszer a szilárd fázisú immunoassay módszer alapelvein alapul (lásd 4.3.2). Az utóbbitól eltérően azonban a TRCA nem használja fel az enzimet mint címkét, hanem a diagnosztikai és kontroll reagenst (lásd 4.3.3).

A TRKA-nak az u alakú lyukakkal rendelkező immunológiai panelek használata. Szenzitizáláshoz a lyukakhoz 0,1 ml 0,01 M karbonát-bikarbonát pufferrel (pH 9,6) hígított 0,1 ml hiperimmun szérumot adunk. A szérum paneleket 2-3 órán át 37 ° C-on tartjuk. A szilárd fázisú ellenanyagokhoz nem kötődnek, háromszor háromszor mossuk. FSBT. Ezután 0,05 ml vizsgálati anyagot, valamint nyilvánvalóan pozitív és negatív mintákat (2 lyuk minden minta esetében) készítsünk a lyukakban, és 2 órán át 37 ° C-on hagyjuk antigén-antitest komplexeket képezni. A nem kötött antigént és a kapcsolódó szennyeződéseket a PBS háromszoros mosásával távolítjuk el. Ezután egy üregben 0,05 ml 0,5% -os staphylococcus diagnosztikát adunk a második (kontroll) 0,05 ml 0,5% -os sztaphylococcus szuszpenzióhoz, melyet előimmun szérummal érzékenyítettek (lásd 4.4.3). Az inkubálást 1-2 órán át 37 ° C-on végezzük, majd 1–3 órán át 4 ° C-on vagy 18-24 órán át 4 ° C-on tartjuk. Az agglutinációs reakció eredményét vizuálisan veszik figyelembe: pozitív reakcióval az agglutinált baktériumok esernyőt alkotnak; negatív reakcióval - a baktériumok teljesen lemezt képeznek.

6.3.5. A közvetett hemagglutináció módszere

Ebben a módszerben a rotavírus antigén kimutatása egy eritrocita antitest diagnosztikán alapul, amely a rotavirus SA-II-vel immunizált fehér patkányok immunglobulin ascites folyadékával szenzibilizált juh eritrociták.

A 10% székletszuszpenzió kétszeres hígításait a panel kutakban eritrocita diagnosztikával vizsgáljuk. Az eritrociták diagnosztikája a rotavírus antigén jelenlétét jelzi a mintában. A PHA megfogalmazására vonatkozó eljárás részletes leírását a készítménykészlethez mellékelt utasítások tartalmazzák (Rostepidkompleks, Rostov-on-Don).

A Rotatest készlet fordított passzív hemagglutináción alapul, és a székletben lévő rotavírus kimutatására és a vérszérum rotavírus elleni antitestek kimutatására szolgál.

6.3.6. A rotavírus immunocitokémiai kimutatásának módszere

Az eljárás a sejtekben szintetizált virális antigén immunokémiai meghatározásán alapul, amely vírus tartalmú anyaggal való fertőzés következtében jön létre.

A módszer előnye az ELISA-hoz képest nagyobb érzékenységű, valamint a vizsgálati minta fertőzőképességének meghatározására és számszerűsítésére.

A kísérlet lefutása: a zöld majom vese transzplantált sejtjei 3-10 sejt / ml koncentrációban 0,2 ml-t tesznek a lapos fenéklemezek lyukakban, és 37 ° C-on (24-48 óra) inkubálják. A sejteket ezután Eagle-MEM közeggel mossuk. A vizsgálati anyagot Eagle-MEM közegben hígítjuk, 1 órán át 37 ° C-on 10 μg / ml tripszin jelenlétében aktiváljuk, és legalább 4 lyukba 0,1 ml-t adunk. A pozitív kontrollok azok a lyukak, amelyekbe be van helyezve a rotavírust tartalmazó anyag. Negatív kontrollok: nem fertőzött sejtekkel és lyukakkal ellátott kutak, amelyekben az anyag hasonló a vizsgálathoz, de nem tartalmaz rotavírusokat. Az adszorpciót 1 órán át 37 ° C-on végezzük, majd a tápközeget eltávolítjuk, a sejteket Eagle-MEM közeggel mossuk. Adjunk 0,2 ml Eagle-MEM táptalajt 1 μg / ml tripszinnel a lyukakba, és 48 órán át inkubáljuk 37 ° C-on.

A sejteket kétszer mossuk sóoldattal, és hideg (-20 °) 85% acetonnal fixáljuk, 2 órán át -20 ° C-on inkubáljuk, majd acetont eltávolítunk. A panelt háromszor mossuk 0,05% Tween 20-at (PBS-T) tartalmazó PBS-sel. 0,1 ml-t hígítottunk 1: 1000-es PBS-T immunhiányos anti-rotavírus szérummal. Inkubáljuk 2 órán át 37 ° C-on. A panel mosása után 0,1 ml peroxidázzal jelölt anti-IgG nyúl antitestet (kereskedelmi készítmény) adunk a lyukakba lyukakban, 2 μg / ml koncentrációban, 1% BSA-val rendelkező PBS-ben lévő peroxidáz tartalommal, és 1,5 órán át 37 ° C-on inkubáljuk. C.

A panelt kétszer mostuk PBS-T-vel és 1 alkalommal 0,05 M acetát pufferrel, pH 5,0. 0,1 ml frissen elkészített peroxidáz szubsztrát-oldatot, amely 10 ml acetátpuffert / 4 mg 3-amino-9-etil-karbazolt (AEC) 0,5 ml acetonban oldunk, és 0,01 ml 33% -os hidrogén-peroxidot adunk a lyukakhoz. (Figyelem! Az AEC használatával óvatosság szükséges). Inkubáljuk 30-40 percig. sötétben, szobahőmérsékleten. A reakciót a panel desztillált vízzel való mosásával állítjuk le.

A reakció elszámolása fénymikroszkóp alatt történik, kis nagyítással. A negatív kontroll kutak nem tartalmazhatnak festett sejteket. A festett sejtek helyi klaszterei a vírusfertőzés fókuszai.

6.3.7. Immunfluoreszcens módszer

A rotavírus antigén immunfluoreszcenciával történő azonosításához 4647 sejtvonalat használunk, a sejteket penicillin ampullákban vagy csövekben lévő fedőlapokon vagy lemezeken tenyésztjük. A fertőzött tenyészetet 37 ° C-on 24-48 órán át inkubáljuk, majd a szemüveget eltávolítjuk az injekciós üvegből, 0,15 M sóoldattal, pH = 7,2 foszfátpuffer hozzáadásával, desztillált vízzel mossuk és levegőn szárítjuk. Ezután a készítményeket két eltolással (mindegyik 10 perc) kémiailag tiszta acetonnal 4 ° C-ra hűtjük.

A készítményeket egy nedves kamrában közvetett módon kezeljük. Egy csepp immun rotavírus nyúlszérumot adunk a tenyésztő sejtekhez, és 30 percig inkubáljuk. 37 ° C-on, majd a gyógyszereket háromszor mossuk az FSB-ben, és eltávolítjuk a felesleges nedvességet. A nedves készítményeket azonos térfogatú anti-FITC-konjugátum és szarvasmarha-albumin elegyével festjük, melyet rodaminnal jelöltünk, és 30 percig inkubáltuk. 37 ° C-on Az FSB-ben 3-szor mosás után a készítményeket levegőben szárítjuk. A nem specifikus fluoreszcencia kiküszöbölése érdekében a vírusellenes szérumot a szokásos sejttenyészet homogenizátumával adszorbeáljuk, és a FITC konjugátumot standard módszerekkel aktív szénnel kezeljük.

Kötelező kontrollként a következő kontrollokat alkalmazzuk: nem fertőzött tenyészetek készítményei, amelyeket hasonló módon kezeltek, és a fertőzött tenyészetek készítményeit, amelyek ugyanazon faj normális és heterológ antivirális szérumának első szakaszában kezeltek, mint a rotavírus immunszéruma.

Pozitív eredmények esetén a sejtek citoplazmájában megfigyelhető világos, világos zöld fluoreszcencia figyelhető meg.

6.4. Rotavírusok elektroforotípus-meghatározási módszere

A módszer a rotavírusok azonosításán alapul virális genomiális RNS szegmensek poliakrilamid gélelektroforézisével. A módszer lehetővé teszi a rotavírus törzsek differenciálását a különböző izolátumok egyes RNS-szegmensei elektroforetikus mobilitásának különbségei alapján, ezért széles körben alkalmazzák a járványügyi vizsgálatokban. A módszer nem igényli az izolátumok elő-tenyésztését, nagy érzékenységgel és abszolút specificitással rendelkezik.

A módszer különösen érdekes az epidemiológusok számára a rotavírus fertőzés kitöréseinek csoportos betegségeinek vizsgálatában.

Az elektroforézis berendezéssel felszerelt laboratóriumok alapján végezhető.

Az elemzéshez elegendő a 0,2 - 0,5 ml 10-20% székletszuszpenzió. A szuszpenziókat a 113-as freonnal kezeljük, és 0,7 mg (0,001 M) nátrium-dodecil-szulfát (1%) és nátrium-etilén-diamin-tetraacetát jelenlétében proteázzal (0,2 mg / ml, 15 perc) inkubáljuk. 0,3 M nátrium-acetát hozzáadása után az RNS-t fenol: kloroform-izoamil-alkohol elegyével eltávolítjuk és 2,5 térfogat etanollal kicsapjuk (18 óra -20 ° C-on vagy 2 óra -70 ° C-on). A csapadékot centrifugálással összegyűjtjük, vízben oldjuk és disszociációs puffert adunk hozzá. Az elektroforézist Laemmli módszerével 10% -os géllemezeken végezzük. Az RNS gélben való festésére általában 0,011 M ezüst-nitrátot használunk. A gélben való megnyilvánulási eljárás után 11 RNS-sáv látható, amelyek megfelelnek a rotavírus genomszegmensének.

6.5. M osztályú immunglobulin meghatározása szérumban

a rotavírus fertőzésben szenvedő beteg szilárd fázisú módszerrel

koagglutinációs reakciók (TRCA)

Ebben az esetben a szilárd fázisú koagglutinációs reakció elvét (lásd 4.3.4.) Használják a módosításban: a panel kutak szenzitizálásához 0,1 ml kereskedelmi forgalomban lévõ, humán IgM elleni monospecifikus szérumot használjunk. A paneleket 2-4 órán át 37 ° C-on inkubáljuk. Ezután a lyukakat FSBT-vel mossuk, 3% -os zselatin-oldattal töltjük és 30 percig 37 ° C-on hagyjuk. A kutak FSBT-t mossanak, és 0,05 ml vizsgált, valamint szándékosan pozitív és negatív szérumot hígítottak 1: 100 FSBT-vel (2 lyuk minden szérumra). Az antitest titer meghatározásakor a vizsgált minták kettős hígítását vizsgáljuk (1:10 - 1: 1280). A paneleket 2 órán át 37 ° C-on inkubáljuk, és mosás után 0,05 ml diagnosztikai és kontroll reagenst vezetünk be a párosított lyukakba. A reakciót 1-2 óra múlva veszik figyelembe (lásd 4.3.4. Pont).

Ugyanez az elv, amit a TRCA módosított, az IgA és IgG antitestek vizsgálatára szolgál rotavírus fertőzésre, valamint a laktoglobulinok kolosztrumának és tejének elemzésére.

Az M osztályú immunglobulin meghatározására szolgáló módszert a beteg szérumában a manifeszt formák korai diagnosztizálására és differenciáldiagnózisukra használják a rotavirus fertőzés tünetmentes formáival.

7. járványellenes intézkedések

A rotavírusok által okozott akut bélfertőzés minden egyes esetére, különösen az első életévi gyermekekre, valamint az óvodai intézményekben részt vevő gyermekekre gondos epidemiológiai elemzésre van szükség ahhoz, hogy azonosítsák a fertőzés forrásait, főbb módjait és tényezőit a járványellenes intézkedések időben történő végrehajtása céljából. a kitörésben.

A fertőzés forrásának azonosítására és semlegesítésére irányuló intézkedések. A betegségre gyanús betegek felismerését valamennyi egészségügyi intézmény orvosai végzik: járóbeteg-látogatások, otthoni látogatások, egészségügyi intézményekben, kórházakban stb. Végzett orvosi vizsgálatok során. Az azonosított betegeket a gyermekcsoportoktól elkülönítik. A betegek orvosi megfigyelése és kezelése otthon vagy kórházban végezhető el. A kórházból kiállított gyermekintézményeket ellátó, vagy negatív laboratóriumi vizsgálatokkal házilag kezelt gyermekeket gyermekgyógyászok tanúsága alapján fogadják el. Gyermekek, akiknek WG-je van és továbbra is kiválik a rotavírusokat (vagy rotavírus-antigént) a fertőzés klinikai megnyilvánulása nélkül, óvodákba és óvodai-óvodákba vehetők be, folyamatos orvosi megfigyelés és ismételt laboratóriumi vizsgálat keretében, 2-3 héten belül. a betegség vagy a vírusizoláció kezdetétől.

Az FG-ben szenvedő betegek családfókuszainak epidemiológiai vizsgálatát a 2 évesnél fiatalabb gyermekek és a felnőttek betegségével végzik a kijelölt kontingensek számától. Az epidemiológus egy felméréssel jár a gyermekintézetbe, ha ismétlődő esetekben nem bakteriális gastroenteritis van.

A betegekkel kommunikáló gyermekek orvosi megfigyelése az utolsó beteg személy elkülönítésétől számított öt napon belül történik.

Gyermekek és felnőttek rotavírusainak (antigénjének) laboratóriumi vizsgálata, akik a családdal és a szervezett csoportokkal egyaránt kommunikáltak a betegekkel, a fertőzés és az epidemiológus utasításai szerint történik, ha vannak jelek (a családban vagy az ismétlődő betegségek gyermekcsapatában OKI-val hasonló klinikával), az egészségügyi és higiéniai rendszer súlyos megsértése, az élelmiszeripari vállalkozások és a hozzájuk hasonló személyek munkavállalói jelenléte a járvány kitörésében stb.). A kötelező laboratóriumi vizsgálatot a beteg gyermek anyja terheli az első életévben. Azok a személyek, akiknél a székletben a rotavírusok (antigén) megtalálhatók, fertőző betegség-szakértő alapos klinikai vizsgálatot végez. A betegség klinikai megnyilvánulásának hiányában a csapat gyermekei és alkalmazottai nem különülnek el.

Élelmiszeripari vállalkozások, vízszolgáltatások stb. az újbóli laboratóriumi vizsgálat idején és az orvosi felügyeletet a létesítményben alkalmazzák. A rotavirusokat (antigént) ürülékkel kiürítő személyek ismételt laboratóriumi vizsgálatát a fertőzés és az epidemiológus előírása szerint, 5-7 napos időközönként végezzük átfogó laboratóriumi vizsgálattal.

Ha csoportos betegségek jelentkeznek gyermekintézetekben, a karanténintézkedéseket az utolsó beteg elkülönítésétől számított 5 napon belül kell elvégezni.

Az intézmények rendszeresen végeznek egészségügyi és oktatási munkát a rotavírus fertőzés megelőzésére.

A fertőzés átviteli mechanizmusának megszüntetésére irányuló intézkedések.

A vizsgálatok 15 perc elteltével +70 ° C-on káros hatást gyakoroltak a rotavírusokra; ultraibolya sugárzásnak kitéve a rotavírusok 15 perc elteltével inaktiválódnak.

A széles körben használt fertőtlenítőszerek hatásával szembeni rezisztenciájuk szempontjából a rotavírusok közel állnak az enterovírusokhoz és az A hepatitishez. Ezért a rotavírus-fertőzés központjában és a kórházakban, ahol vannak betegek, célszerű fertőtlenítési intézkedéseket végrehajtani a kezelési módok szerint és a vírus hepatitisre ajánlott módszerekkel. A és enterovírusos fertőzések (NSZ 4. Sz. Melléklet a Szovjetunió Egészségügyi Minisztériumának N 752. Sz. 078. Sz. Rendelete és az Egészségügyi Minisztérium N 916. Sz. Különös figyelmet kell fordítani a gyermekeket kiszolgáló személyek, valamint a betegellátáshoz használt mellbimbók, játékok, edények és egyéb tárgyak megfelelő kezelésére.

Rendszeres ultraibolya sugárzás ajánlott. Az ultraibolya sugárzást rendszerint besugárzók - OBN-150 - 30 köbméteren végzik. m szobák, OBP-300 60 cu. m szobák és mások. Az árnyékolatlan takarmányok 1 - 1,5 W / 1 cu-ra vannak beállítva. m helyiségek emberek távollétében (a nyálkahártya károsodásának elkerülése érdekében), árnyékolt - 2 - 2,5 W / 1 cu. m, besugárzás végezhető emberek jelenlétében. Fertőtlenítési idő - 30 - 40 perc. A levegő besugárzását a szoba tisztítása, az ágynemű cseréje és a por aeroszol képződésével kapcsolatos egyéb munkák után kell elvégezni.

A kórházi személyzet speciális osztályain légzőmaszkokat kell viselni.

A rotavírus-fertőzés megelőzésére irányuló egészségügyi és higiéniai intézkedések megszervezését a jelenlegi fertőzésekre vonatkozó utasításokkal és ajánlásokkal összhangban végzik a kórokozó terjedésének széklet-orális mechanizmusával.

Az újszülöttekben a rotavírus fertőzés megelőzésének egyik hatékony intézkedése a szoptatás.

A rotavírus fertőzés specifikus megelőzése nem történik meg.